小鼠羧化不全骨钙素（ucOC）ELISA试剂盒操作流程

小鼠羧化不全骨钙素（ucOC）ELISA试剂盒操作流程：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

为了减小过失，是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问，我公司技术人员是这样说明的：
1. 前者测的是稀释和移液的过失，后者只需移液过失。
2. 一般都是稀释一次，分两孔吧。同浓度的分复孔。
3. 由于是从同一原液稀释，一般不考虑稀释过失(稀释过失是存在的)，都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是逐个稀释，这样可以使稀释过失减小)。
4. 复孔是为了扫除移液体积，板的影响，以及其他系统过失的，要求复孔的浓度是一起的。稀释后分孔能满意此要求，逐个稀释不能。